組織培養和分子細胞學技術 (下) 分子細胞學技術

組織培養和分子細胞學技術 (下) 分子細胞學技術 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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具體描述

全書分為組織培養和分子細胞學兩部份,論述瞭細胞體外培養、細胞培養方法、各種研究技術以及核酸萃取與分離、放射性同位素標記、細菌培養、內切□技術、基因工程、基因診斷和治療等多種新技術應用。本書總結瞭作者多年來的研究發展,介紹瞭國內外的先進經驗,具有很高的學術價值。其內容豐富、資料新穎、重點突齣、圖文並茂,有很高的實用性和科學性,是一部實驗研究人員、臨床醫師、醫學院校師生及農業、生物等各專業人員的必備工具書。
細胞與組織培養技術:理論基礎與實驗精要 (上冊) 書籍簡介 本書聚焦於生命科學研究的核心技術領域——細胞與組織培養,旨在為科研人員、實驗室技術人員以及相關專業學生提供一套全麵、深入且實用的技術指南。本書作為係列叢書的上部,著重闡述細胞培養的基礎理論、無菌操作規範、常用培養基的配置與優化,以及原代細胞和永生化細胞係的建立與維護等關鍵環節。 本書的編纂立足於對現代生物醫學研究前沿需求的深刻理解,摒棄瞭對分子細胞學具體實驗操作的冗餘描述(如PCR、Western Blot、免疫熒光等),而是將全部篇幅集中於構建和維持一個穩定、可重復的細胞培養環境這一前提工作。我們深知,任何後續的分子或細胞水平的分析,其可靠性都直接依賴於初始細胞培養體係的質量。 第一部分:細胞培養的理論基石與環境控製 本部分是全書的理論核心,為讀者建立起紮實的理論框架。 第一章:細胞培養的曆史沿革與基本概念 本章首先梳理瞭體外細胞培養技術自20世紀初發展至今的關鍵裏程碑事件,包括首次成功建立的細胞係和重要的技術突破。隨後,詳細界定瞭生物學中關於“原代培養物”、“傳代細胞係”、“有限傳代細胞”與“無限傳代細胞(永生化細胞)”等核心術語的精確定義及其生物學意義。重點探討瞭細胞形態學分類(如上皮樣、成縴維樣、神經元樣)與遺傳穩定性之間的關係,為後續實驗選擇閤適的細胞模型打下基礎。 第二章:微生物學基礎與無菌技術的核心原則 無菌操作是細胞培養的生命綫。本章深入講解瞭微生物汙染的來源(空氣、水、培養基、操作者本身)及潛在風險評估。詳細闡述瞭超淨工作颱(Laminar Flow Hood)的正確使用流程、氣流模式分析及其維護標準。書中提供瞭詳盡的滅菌方法對比,包括乾熱滅菌、濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌器的運行參數與驗證),以及對紫外綫照射的有效性和局限性的科學評估。本章特彆強調瞭個人防護設備(PPE)在防止交叉汙染中的關鍵作用。 第三章:培養環境的物理化學參數調控 細胞的體外生存依賴於對體內環境的精確模擬。本章詳細分析瞭關鍵環境因素: 1. 溫度控製係統: 恒溫培養箱的精度要求、溫度監測與校準的標準化流程。 2. 氣體環境管理: 二氧化碳(CO2)在維持pH平衡中的作用機製(碳酸緩衝係統),以及對氧氣濃度(O2)敏感細胞(如低氧誘導研究)的特殊培養要求。 3. 濕度與蒸發速率的控製: 探討瞭水盤和濕潤化對培養皿內滲透壓穩定性的影響。 第二部分:培養基的科學配置與優化 培養基是細胞的“營養液”,其質量直接決定瞭細胞的生長狀態和實驗的可重復性。 第四章:基礎培養基的成分解析與選擇策略 本章係統拆解瞭主流基礎培養基(如DMEM, RPMI-1640, F-12等)的化學組成。詳細分析瞭無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖(能量來源)以及pH指示劑的作用。針對不同來源(如哺乳動物、昆蟲、植物細胞)的培養需求,提供瞭選擇標準和配方調整的基本原則。 第五章:血清與血清替代品的選擇、處理與功能評估 胎牛血清(FBS)是細胞培養中最常用的生長因子來源,但其批次間差異巨大。本章深入探討瞭FBS的采集閤格標準、熱滅活的必要性與操作細節。此外,還介紹瞭無血清培養(Serum-Free Media, SFM)的概念,並對重組生長因子和蛋白替代品的劑量效應進行瞭討論,為追求高可重復性研究的實驗室提供指導。 第六章:抗生素的使用規範與汙染的早期識彆 抗生素(如青黴素-鏈黴素、慶大黴素)在常規培養中用於抑製細菌汙染,但長期使用可能掩蓋低水平汙染或對某些細胞類型産生毒性。本章詳細論述瞭抗生素的最佳使用濃度、預防性添加與治療性添加的區彆。更重要的是,本章提供瞭早期汙染的視覺、氣味和生長麯綫監測方法,強調瞭定期(例如每周)的顯微鏡下細胞形態檢查的重要性,區分真菌、細菌和支原體汙染的典型特徵。 第三部分:細胞的建立與常規操作技術 本部分側重於從組織獲取到穩定傳代的實際操作流程。 第七章:原代細胞的分離與初始培養 原代細胞代錶瞭最接近體內生理狀態的細胞群。本章詳細介紹瞭從不同組織(如肝髒、皮膚、血管內皮)獲取細胞的步驟,包括機械解離和酶消化法(如使用胰酶、膠原酶、Dispase)。重點講解瞭酶消化的優化,如酶的濃度選擇、反應時間和溫度控製,以最大化活性細胞的迴收率,同時最小化細胞損傷。隨後的初次貼闆和首次換液的技術要點被細緻闡述。 第八章:細胞係的傳代、冷凍與復蘇 細胞傳代是維持細胞係穩定性的核心操作。本章詳細規範瞭細胞生長的最佳密度判斷、胰酶消化(EDTA/Trypsin)的最佳接觸時間,以及如何在保證細胞活力的前提下進行閤理的稀釋比選擇。針對長期保存需求,本章提供瞭細胞冷凍與復蘇的“慢速降溫/快速升溫”標準流程,包括不同冷凍保護劑(如DMSO)的濃度梯度選擇和液氮儲存的安全規範。 第九章:細胞的計數、活性評估與生物安全性 在沒有涉及分子檢測的前提下,本章集中闡述瞭評估細胞健康狀況的傳統方法。詳細介紹瞭血細胞計數闆的準確使用技巧,以及颱盼藍(Trypan Blue)染色法在區分活細胞與死細胞中的應用原理。此外,還涵蓋瞭細胞生長麯綫的繪製方法,用以監測不同代次細胞的生長速率變化,是判斷細胞是否發生“老化”或“剋隆選擇”的重要指標。 本書的宗旨是確保讀者能夠獨立、高效、安全地建立和維護高質量的細胞培養係統,為後續深入的分子細胞學研究提供堅實可靠的物質基礎。

著者信息

圖書目錄

圖書序言

圖書試讀

用戶評價

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對我來說,這本書的書名,就像一個指嚮我職業生涯中關鍵技能樹的坐標。我是一名在生物信息學領域工作的研究員,我的工作是利用計算和統計的方法來分析海量的生物學數據,包括基因組學、轉錄組學、蛋白質組學等。而所有這些數據的産生,都離不開分子細胞學技術的支持。例如,基因測序技術産生瞭大量的基因組數據,RNA測序技術産生瞭轉錄組數據,質譜技術産生瞭蛋白質組數據。如果我對這些數據的來源和生成原理不甚瞭解,那麼對數據的解讀就會顯得片麵。我期待這本書能夠詳細介紹各種高通量測序技術,比如全基因組測序、外顯子組測序、RNA-Seq等,並解釋它們的工作原理和數據特點。同時,我也對蛋白質組學中的質譜技術,以及單細胞分析技術很感興趣。這些技術能夠讓我們從更微觀的層麵來理解生命活動。如果書中能提供一些關於如何設計實驗來生成適閤生物信息學分析的數據的建議,那就更好瞭。因為很多時候,實驗設計的好壞,直接決定瞭我們能夠獲得的數據質量和分析的深度。總之,我希望這本書能幫助我更好地理解分子細胞學技術與生物信息學之間的聯係,從而提升我的數據分析能力和研究水平。

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在我還是一個對科學世界充滿憧憬的研究生初期,分子細胞學技術對我來說,就像是一扇通往未知領域的大門,充滿瞭神秘和誘惑。那時候,我常常為那些能夠操控DNA、蛋白質,甚至改變細胞命運的科學傢們感到無比的欽佩。這本書的書名,特彆是“分子細胞學技術”,讓我聯想到那些精妙的實驗設計和嚴謹的操作流程。我期待這本書能夠係統地介紹一些我一直很感興趣的技術,比如基因敲除、基因敲入技術,以及如何利用這些技術來研究基因的功能。同時,我也對免疫學在分子細胞學研究中的應用很感興趣,比如如何利用抗體來檢測特定的蛋白質,如何進行免疫沉澱來研究蛋白質之間的相互作用,以及如何利用流式細胞術來分析細胞錶麵的標誌物。這些技術在腫瘤免疫治療、疫苗研發等領域都有著至關重要的作用。我希望這本書能夠提供一些實際的實驗案例,展示這些技術是如何被應用於解決具體的科學問題。而且,如果書中還能包含一些關於數據分析和可視化方麵的指導,那就更完美瞭,因為在科研過程中,如何有效地呈現和解讀實驗數據,也是一個非常重要的環節。

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這本《組織培養和分子細胞學技術 (下) 分子細胞學技術》的書名,第一眼看過去就讓我這個在生物技術領域摸爬滾打瞭多年的老鳥,內心湧起一股莫名的親切感。我記得我剛開始接觸分子細胞學的時候,那簡直是摸著石頭過河,各種名詞、各種實驗操作,看得我頭暈眼花。那時候要是有一本像這樣,從基礎概念講起,再深入到具體技術的書,那該省多少事啊!尤其是在我工作的實驗室裏,雖然我們主要做的是基因編輯和細胞治療,但分子細胞學的紮實基礎是必不可少的。很多時候,一個看似微小的細胞行為,背後牽扯到的可能就是復雜的信號通路、精密的基因調控,甚至是蛋白質的摺疊和相互作用。這本書的名字暗示著它會涵蓋這些內容,而且“下”這個字,讓我對它前一部分《組織培養》的內容也充滿瞭好奇。畢竟,脫離瞭健康的細胞,再精密的分子技術也無從談起。我特彆期待書中關於細胞周期調控、DNA復製與修復、轉錄與翻譯機製,以及各種細胞信號轉導通路的內容。要知道,這些是理解細胞生命活動最核心的原理。如果它能結閤一些實際的案例,比如在癌癥研究中,某個信號通路失調是如何導緻細胞不受控製地增殖的,或者在發育生物學中,細胞如何通過精確的時空信號識彆,最終分化成不同類型的組織和器官,那就更好瞭。我個人對蛋白質組學和代謝組學也一直很感興趣,希望這本書能對這些新興領域有所涉獵,或者至少能為我提供理解這些更復雜技術的基礎。畢竟,分子細胞學是這一切的基石。

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作為一個在生物科普領域耕耘多年的撰稿人,我一直在尋找能夠幫助我更準確、更生動地嚮大眾介紹生命科學前沿知識的素材。這本書的書名,特彆是“分子細胞學技術”,讓我看到瞭一個巨大的潛力。我深知,分子細胞學是理解生命本質的關鍵,但對於非專業人士來說,這些概念往往晦澀難懂。我期待這本書能夠提供清晰的解釋,將那些復雜的科學原理,以通俗易懂的方式呈現齣來。我尤其關注書中關於DNA復製、轉錄、翻譯等生命基本過程的講解,以及關於基因工程、細胞工程等應用技術的介紹。如果書中能用生動形象的比喻,或者有趣的圖示來解釋這些概念,那將極大地提升我的科普創作的質量。同時,我也對書中關於分子診斷、基因治療等與人類健康息息相關的技術內容很感興趣,因為這些是公眾最關心的話題之一。如果這本書能夠為我提供可靠的科學依據和豐富的素材,幫助我 debunk 一些流傳的“僞科學”信息,那就太有價值瞭。我希望通過閱讀這本書,能夠讓我更深入地理解分子細胞學技術的魅力,並將其轉化為更具吸引力的科普內容。

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這本書的書名,在我眼中,簡直就是一本“武功秘籍”,尤其是在我這樣一個生物係本科畢業,但對實際操作還不太熟練的“菜鳥”來看。我一直對生命科學充滿好奇,尤其是在課堂上學到一些關於基因、細胞的知識,總覺得非常神奇。但是,當老師講到具體的實驗操作時,我常常會覺得雲裏霧裏。這本書如果能夠將那些看起來高大上的分子細胞學技術,用一種更易於理解的方式呈現齣來,那我簡直太幸運瞭。我特彆期待書中能有關於如何進行DNA提取和純化,如何使用PCR技術來擴增DNA片段,以及如何進行凝膠電泳來分離DNA的詳細說明。這些都是最基礎但也非常重要的技術,掌握好瞭,以後學習更高級的技術就會容易很多。而且,我希望書中能有一些關於如何觀察細胞形態,如何利用顯微鏡來觀察細胞內部結構的介紹。畢竟,細胞的形態和結構,往往能反映齣它的一些生理狀態。如果書中還能有一些關於細胞培養的基本知識,比如如何維持細胞的活性,如何避免汙染,那就更好瞭。我希望通過閱讀這本書,能夠讓我對分子細胞學技術有一個初步的認識,並且能夠激發我對這個領域更深入的學習興趣。

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對於我這樣一位在大學化學係任教多年的老師來說,分子細胞學技術是我們教學和科研中越來越不可或缺的一部分。雖然我的主要研究方嚮是催化化學,但我常常需要與生物係的老師閤作,進行一些生物催化、藥物設計相關的項目。這就要求我對分子細胞學技術有基本的瞭解,並且能夠指導學生進行相關的實驗。這本書的書名,特彆是“分子細胞學技術”這幾個字,讓我眼前一亮。我一直覺得,現代生物學的發展,很大程度上是依賴於分子生物學和細胞生物學技術的進步。這本書如果能係統地介紹這些技術,並且能夠將理論與實際應用相結閤,那對我的教學和科研都將非常有益。我尤其關注書中關於基因剋隆、重組DNA技術、核酸提取與純化、DNA測序技術,以及細胞培養中無菌操作和營養介質配製的內容。這些是基礎中的基礎,但對於初學者來說,往往是難點。如果書中能提供清晰的圖示和詳細的步驟說明,並且解釋為什麼需要這樣做,那會非常有幫助。而且,我非常希望這本書能包含一些關於如何利用這些技術來構建基因錶達載體、如何進行基因沉默或基因激活,以及如何利用DNA重組技術來生産重組蛋白的內容。

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作為一個即將畢業的博士生,我現在最頭疼的就是如何在論文裏清晰、有邏輯地呈現我的研究結果,尤其是那些關於分子機製的部分。我用的實驗技術涉及瞭不少,從基礎的RNA提取、cDNA閤成,到qPCR、Western Blot,再到免疫熒光染色,最後還有一些通路驗證的實驗。每次寫到這些部分,我總覺得不夠深入,或者說,我的描述可能無法讓一個非本領域內的人完全理解。這本書的齣現,對我來說,簡直是救星!它如果能詳細講解這些常用技術的工作原理、實驗步驟、注意事項,以及結果的判讀,那我寫論文的時候,就可以更有底氣瞭。我特彆期待書中關於如何設計一個閤理的實驗來驗證某個分子機製的內容。比如,如何通過敲低或過錶達某個基因,來觀察其對下遊蛋白錶達或細胞行為的影響;如何利用siRNA或shRNA來特異性地沉默基因;如何設計特異性的抗體來檢測蛋白質的錶達和定位。而且,如果書中還能包含一些關於如何處理和分析實驗數據的指導,比如Western Blot條帶的灰度值計算、qPCR的ΔΔCt法計算,甚至是一些統計學上的建議,那簡直就是完美瞭。我希望這本書能讓我不僅會做實驗,更能“說清楚”我做的實驗,並且有理有據地支持我的研究結論。

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這本書的齣現,簡直是為我這種還在實驗室一綫摸索的博士後研究員量身定做的。要知道,我們這個領域,更新換代的速度快得嚇人,每年都有新的技術、新的發現冒齣來。我平時的工作主要是圍繞著CRISPR-Cas9技術在神經退行性疾病模型上的應用,涉及大量的細胞培養、基因轉染、蛋白免疫印跡(Western Blot)、PCR以及流式細胞術等。每一次實驗的成功與否,都取決於對這些分子細胞學技術的深刻理解和熟練操作。這本書如果能詳細闡述這些核心技術,那簡直就是及時雨。我尤其關注它在超分辨率顯微鏡技術、單細胞測序技術以及錶觀遺傳學研究方麵的內容。這些技術是當前生命科學研究的前沿,掌握它們,能大大提升我們探索生命奧秘的能力。例如,單細胞測序,它能夠揭示細胞群中的異質性,這對於理解疾病的發生發展,以及開發更精準的治療策略至關重要。而錶觀遺傳學,它研究的是在不改變DNA序列的情況下,基因錶達如何被調控,這在癌癥、發育等領域都扮演著關鍵角色。如果這本書能在這幾個方麵提供清晰的理論解釋、實驗設計思路,甚至是一些操作上的“小貼士”,那對我來說,價值就太大瞭。我希望它不僅僅是技術的羅列,更能解釋背後的原理,以及如何在實際研究中靈活運用。

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作為一個在大學實驗室裏負責管理和維護各種儀器設備的工程師,我對“分子細胞學技術”這個名詞有著非常直接的感受。我每天都要麵對各種各樣的儀器,從PCR儀、離心機,到各種顯微鏡、流式細胞儀,它們都是支持分子細胞學研究的硬件基礎。這本書如果能詳細介紹這些技術背後的原理,以及它們在實驗中的具體應用,那我就可以更好地理解這些儀器是如何工作的,以及如何更好地為科研人員提供支持。我尤其關注書中關於細胞成像技術,比如熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡,以及電子顯微鏡的內容。瞭解這些技術,不僅能讓我更好地維護和操作這些設備,還能幫助我理解科研人員在實驗中遇到的問題,並提供更有效的解決方案。此外,我也對一些更前沿的技術,比如單分子檢測技術、細胞計量學等內容很感興趣。這些技術往往需要更精密的儀器和更專業的操作,如果書中能對此有所介紹,那我將受益匪淺。總而言之,我希望這本書能夠成為我理解和支持分子細胞學研究的一個重要參考,讓我能夠更專業、更高效地為科研工作者服務。

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我是一名在生物製藥公司從事新藥研發的科學傢,平時的工作離不開各種分子細胞學技術。我們公司主要緻力於開發靶嚮藥物,所以對於細胞信號通路、激酶抑製劑、藥物代謝等方麵的研究尤為深入。這本書的書名,特彆是“分子細胞學技術”,一下子就抓住瞭我的關注點。我期待這本書能深入講解那些與藥物研發緊密相關的技術,比如如何利用細胞模型來篩選藥物的有效性和毒性,如何評估藥物對特定信號通路的影響,以及如何利用熒光染料或熒光蛋白來標記和追蹤藥物在細胞內的分布和作用。我尤其感興趣書中關於高通量篩選(HTS)技術,以及基於細胞的生物傳感器的內容。這些技術能夠極大地提高我們篩選候選藥物的效率,並且能夠更直觀地觀察藥物的作用機製。同時,我也希望書中能包含一些關於如何利用基因編輯技術來構建疾病模型,以更好地模擬人類疾病的發生發展,從而為藥物研發提供更可靠的平颱。另外,對於我們從事生物製藥的研究人員來說,理解細胞凋亡、自噬等細胞程序性死亡機製,以及細胞的增殖和分化機製,也是至關重要的,因為這直接關係到藥物的療效和副作用。

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